掃描電鏡是用于觀測組織或材料表面形貌的重要工具。以下是SEM掃描電鏡的操作規(guī)范介紹：

一、準(zhǔn)備階段

樣品準(zhǔn)備：

確保樣品已完全干燥。

準(zhǔn)備必要的耗材，如樣品臺、導(dǎo)電膠帶、鑷子、剪刀和手套。

使用導(dǎo)電膠帶將樣品固定在樣品臺上，并確保樣品牢固粘貼。操作過程中應(yīng)佩戴手套，以防污染樣品。

噴金鍍膜：

由于生物組織等樣品不具備導(dǎo)電性，需進(jìn)行噴金鍍膜處理，以增加形貌襯度。

噴金參數(shù)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體設(shè)備進(jìn)行調(diào)整，需提前與負(fù)責(zé)老師或技術(shù)人員確認(rèn)。

二、安裝樣品臺

打開電腦和軟件：

啟動電腦，雙擊掃描電鏡的軟件圖標(biāo)以打開軟件。

連接SEM掃描電鏡：

根據(jù)軟件提示，點(diǎn)擊“確定”以連接掃描電鏡設(shè)備。

安裝樣品臺：

點(diǎn)擊右上角“快速換樣”，根據(jù)彈窗指示，點(diǎn)擊“確定”。此時樣品臺移動至規(guī)定位置。

點(diǎn)擊交換倉“抽氣”按鍵，開始交換倉抽真空操作，直至指示燈常亮，提示真空狀態(tài)已完成。

點(diǎn)擊交換倉“開/關(guān)傳輸門”按鍵，打開交換倉與樣品倉之間的隔板。

打開樣品桿鎖扣，向內(nèi)推進(jìn)樣品桿至底部，順時針轉(zhuǎn)動樣品桿旋鈕，鎖定樣品臺并向外拉出樣品桿，鎖上鎖扣。此時，樣品臺被樣品桿從樣品倉中取出至交換倉。

再次點(diǎn)擊交換倉“開/關(guān)傳輸門”按鍵，關(guān)閉交換倉與樣品倉之間的隔板。

點(diǎn)擊交換倉“放氣”按鍵，解除交換倉真空狀態(tài)，然后打開交換倉，放入樣品。

關(guān)上交換倉，依次執(zhí)行“抽氣”、“開/關(guān)傳輸門”推進(jìn)樣品桿操作。待樣品臺進(jìn)入指定位置后，逆時針旋轉(zhuǎn)樣品桿旋鈕，拉出樣品桿，并關(guān)上隔板。

三、SEM掃描電鏡觀察

選擇樣品臺：

點(diǎn)擊軟件右上角“工作”按鈕，根據(jù)彈窗提示選擇已安裝的樣品臺。

開啟束流：

點(diǎn)擊軟件右上角“打開束流”按鈕，以開啟電子束流。

導(dǎo)航拍照：

點(diǎn)擊軟件左下角“導(dǎo)航拍照”按鈕，導(dǎo)入樣品導(dǎo)航界面。

設(shè)置工作高度和樣品高度：

根據(jù)樣品的高度和類型，在Z軸輸入窗口輸入相應(yīng)的數(shù)值，以界定工作高度和樣品高度。

移動樣品位置：

在樣品導(dǎo)航界面用鼠標(biāo)雙擊，以移動樣品位置。這通常用于定位不同的樣品。

在成像界面用鼠標(biāo)雙擊，同樣可以移動樣品位置。這通常用于觀察同一樣品的不同位置。

圖像調(diào)節(jié)：

使用鼠標(biāo)滾輪進(jìn)行圖像的放大和縮小操作。

點(diǎn)擊工具欄的相應(yīng)按鈕進(jìn)行樣品預(yù)覽、亮度和對比度的調(diào)節(jié)。

在放大倍數(shù)較小時，可以點(diǎn)擊工具欄的按鈕進(jìn)行自動聚焦和自動消像散。

在放大倍數(shù)較大時，采用手動聚焦。點(diǎn)擊工具欄的“慢掃”和“選區(qū)”功能，將選區(qū)框移動至居中位置。然后按住鼠標(biāo)右鍵左右滑動，以確定焦點(diǎn)位置（*清晰時）。取消“選區(qū)”后，該焦點(diǎn)將應(yīng)用于整個視野。

四、注意事項(xiàng)

電源穩(wěn)定：

確保電源穩(wěn)定，避免電壓波動過大，以保護(hù)掃描電鏡設(shè)備和樣品。

真空度要求：

在加高壓前，真空度B須達(dá)到額定值。氣體電離度大會損傷電子槍。

完成SEM掃描電鏡觀察后，應(yīng)關(guān)閉高壓，并等待至少30秒以上，待燈絲冷卻后再進(jìn)行放氣操作，以保護(hù)電子槍。

樣品臺移動限制：

樣品臺在平面方向和上下方向都有額定移動距離。當(dāng)移動到極限位置時，設(shè)備會發(fā)出報(bào)警提示。此時，應(yīng)立即停止移動并往回移。

在向上移動樣品臺時，應(yīng)緩慢操作，以防止堅(jiān)硬樣品撞擊上方的探測器和極靴，從而損壞設(shè)備。

電子束與樣品作用：

在掃描電鏡觀察過程中，電子束與樣品會發(fā)生相互作用，激發(fā)出多種信號。這些信號包括二次電子信號（用于形貌觀察）、背散射電子信號（用于區(qū)分微區(qū)成分）等。應(yīng)根據(jù)觀察目的選擇合適的信號進(jìn)行觀察和分析。

綜上所述，SEM掃描電鏡的操作規(guī)范涉及樣品準(zhǔn)備、安裝樣品臺、掃描電鏡觀察和注意事項(xiàng)等多個方面。只有嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行操作，才能確保SEM掃描電鏡設(shè)備的正常運(yùn)行和觀察結(jié)果的準(zhǔn)確性。